ABO血型鑒定方法主要有玻片法、試管法、微柱凝膠法、毛細(xì)管法和紙片法。

一、玻片法

玻片法是一種操作簡(jiǎn)便的血型鑒定技術(shù)，通常在載玻片上分別滴加抗A與抗B標(biāo)準(zhǔn)血清，再與受檢者的紅細(xì)胞懸液混合后觀察凝集反應(yīng)。該方法無(wú)須復(fù)雜設(shè)備且反應(yīng)迅速，適合大規(guī)模初步篩查或應(yīng)急場(chǎng)合使用。由于玻片法易受環(huán)境溫度與主觀判讀影響，可能出現(xiàn)結(jié)果偏差，需由經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)人員操作。當(dāng)出現(xiàn)弱凝集或混合視野現(xiàn)象時(shí)，應(yīng)結(jié)合其他方法復(fù)核確認(rèn)結(jié)果準(zhǔn)確性。

二、試管法

試管法通過(guò)離心加速抗原抗體反應(yīng)，將受檢者紅細(xì)胞與標(biāo)準(zhǔn)血清在試管中混合后離心觀察凝集強(qiáng)度。這種方法顯著提高檢測(cè)靈敏度，能有效識(shí)別亞型血型與弱抗原表達(dá)情況。試管法可采用生理鹽水介質(zhì)或添加增強(qiáng)劑改進(jìn)反應(yīng)效果，適用于輸血前復(fù)核與疑難血型鑒定。操作時(shí)需嚴(yán)格控制離心速度與時(shí)間，避免過(guò)度離心導(dǎo)致假陽(yáng)性或離心不足造成假陰性結(jié)果。

三、微柱凝膠法

微柱凝膠卡利用凝膠顆粒的分子篩作用，通過(guò)離心后紅細(xì)胞在微柱中的分布位置判斷凝集情況。該方法實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作與結(jié)果判讀自動(dòng)化，有效減少人為誤差并保留原始結(jié)果便于復(fù)查。微柱凝膠法對(duì)DAT陽(yáng)性樣本可能產(chǎn)生干擾，需結(jié)合直接抗人球蛋白試驗(yàn)進(jìn)行鑒別。這種技術(shù)現(xiàn)已成為臨床輸血科的主流方法，特別適合批量檢測(cè)與血型參比實(shí)驗(yàn)室使用。

四、毛細(xì)管法

毛細(xì)管法借助毛細(xì)作用使反應(yīng)液在微細(xì)管道內(nèi)遷移，通過(guò)觀察紅細(xì)胞凝集阻滯現(xiàn)象進(jìn)行血型判定。該技術(shù)所需樣本量極少且反應(yīng)快速，適合新生兒血型篩查與微量樣本檢測(cè)。毛細(xì)管裝置可預(yù)制凍干試劑延長(zhǎng)保存期限，但需注意環(huán)境濕度對(duì)毛細(xì)流速的影響。操作時(shí)應(yīng)確保樣本充分混勻與加樣精準(zhǔn)，避免氣泡產(chǎn)生導(dǎo)致結(jié)果誤判。

五、紙片法

紙片法使用特殊濾紙載體制備血樣，通過(guò)層析原理使標(biāo)準(zhǔn)抗體與紅細(xì)胞膜抗原結(jié)合產(chǎn)生顯色反應(yīng)。這種方法便于樣本采集、運(yùn)輸與長(zhǎng)期保存，適用于野外作業(yè)與偏遠(yuǎn)地區(qū)血型普查。紙片法對(duì)樣本血量與血細(xì)胞比容有特定要求，需嚴(yán)格按照說(shuō)明書控制血量浸潤(rùn)范圍。在高溫高濕環(huán)境中應(yīng)注意防潮保存試劑卡，避免層析膜變性影響檢測(cè)準(zhǔn)確性。

進(jìn)行ABO血型鑒定前應(yīng)確認(rèn)受檢者近期未輸注血制品或造血干細(xì)胞移植，避免出現(xiàn)血型嵌合現(xiàn)象干擾結(jié)果。采血過(guò)程需嚴(yán)格無(wú)菌操作并使用EDTA抗凝試管防止樣本凝固，溶血或脂血樣本可能影響判讀需重新采集。當(dāng)正反定型結(jié)果不一致時(shí)應(yīng)進(jìn)行抗體篩查與吸收放散試驗(yàn)，結(jié)合家族血型調(diào)查與基因分型技術(shù)明確血型類別。日常應(yīng)注意保持標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)與特異性，定期參加室間質(zhì)評(píng)確保檢測(cè)系統(tǒng)可靠性。